L'enzyme convertit le phosphate 3'-terminal de divers substrats d'ARN en phosphodiester 2 ', 3'-cyclique dans une réaction dépendante de l'ATP. La catalyse se produit par un mécanisme en trois étapes, commençant par l'activation de l'enzyme par l'ATP, formant une liaison phosphoramide entre l'adénylate et un résidu histidine [5,6]. Le groupe adénylate est ensuite transféré à l'extrémité 3'-phosphate du substrat, formant la structure coiffée [ARN] -3 '- (5'-diphosphoadénosine). Enfin, l'enzyme catalyse une attaque de l'O-2 'vicinal sur le 3'-phosphore, qui se traduit par la formation de phosphate cyclique et la libération de l'adénylate. L'enzyme a également une activité d'adénylation polynucléotidique 5 '[7].? Cf. EC 6.5.1.5, ARN 3'-terminal-phosphate cyclase (GTP).
